Skillnad mellan HPLC och snabb HPLC

De nyckelskillnad mellan HPLC och snabb HPLC är det Det pumptryck som vi använder för HPLC är cirka 40 MPa medan pumptrycket för snabb HPLC är 3-5 MPa.

Den vanligaste tekniken som vi använder för att skilja komponenter i en blandning är "vätskekromatografi". Det finns flera tekniker för att uppnå detta syfte, varav HPLC är mycket populär. HPLC står för High Performance Liquid Chromatography som identifierar, kvantifierar och separerar komponenter i en flytande blandning på ett snabbt och effektivt sätt. Snabb HPLC är en speciell tillämpning av HPLC som senast har tagit uppmärksamheten hos de som är involverade i studien av lösningar.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är HPLC
3. Vad är snabb HPLC
4. Jämförelse vid sida vid sida - HPLC mot snabb HPLC i tabellform
5. Sammanfattning

Vad är HPLC?

HPLC är högprestanda vätskekromatografi. Det använder sig av högt tryck för att driva lösningsmedel så att de passerar genom en kolonn. Det är också ett idealiskt sätt att skilja och studera olika föreningar som aminosyror, nukleinsyror, kolhydrater, steroider, antibiotika och kolväten. HPLC har många fördelar jämfört med andra metoder för separation av blandningar, såsom högre upplösning och snabbare analys. Det utplånar behovet av ompackning och regenerering och ger bättre kontroll över parametrar och därmed ökar separationseffektiviteten. Helst passar HPLC för storskaliga applikationer eftersom det kan separera mycket små partiklar och möjliggör användningen av höga tryck som gör det lätt för lösningsmedel att flyta lätt.

Figur 01: HPLC-kolonn

Kortfattat är förfarandet för användning av HPLC-tekniken som följer. Först bör vi introducera provet i strömmen av mobil fas i diskreta små mängder med en pump. Pumptrycket bör bibehållas vid 40 MPa. Denna ström av mobilfas perkolerar genom kolonnen HPLC. Sedan passerar komponenterna i provet också genom kolonnen. Däremot skiljer sig deras rörelseshastigheter från varandra på grund av skillnaden i interaktionerna mellan provkomponenterna och adsorbenten inuti kolonnen. Vi kallar denna adsorbent som den stationära fasen eftersom den ligger inuti kolumnen (flyttar inte). Sedan, i slutet av kolumnen, kan vi samla det prov som eluerar från kolonnen, så att vi kan samla komponenterna i provet separat.

Vad är snabb HPLC?

Nyligen forskare vid Schering Ploughforskningsinstitutet utvecklade en snabb HPLC-teknik som är en avancerad version av HPLC, eftersom det möjliggör en ännu snabbare separation av föreningar från en blandning. Även känd som snabb HPLC utnyttjar denna teknik en 2,7-fusad kärnkiseldioxidpartikel som framställs genom att fusera 0,5um porös kiseldioxid över en fast kiseldioxidpartikel. Dessa unikt framställda partiklar gör förfarandet för separation väldigt snabbt och det också vid lågt tryck än vad vi använder i HPLC.

Figur 02: FPLC Apparatus

Snabb HPLC ger resultat jämförbara med UPLC, men forskare anser att denna teknik är överlägsen, eftersom den inte kräver mycket dyr ultrahög tryckutrustning. Det som är bra är att snabb HPLC inte kräver några nya laboratorieprotokoll.

Vad är skillnaden mellan HPLC och snabb HPLC?

HPLC är högprestandad vätskekromatografi och snabb HPLC är en avancerad form av högprestanda vätskekromatografi. Nyckelfaktorn mellan HPLC och snabb HPLC är att pumptrycket som vi använder för HPLC är cirka 40 MPa. Medan pumptrycket för snabb HPLC är omkring 3-5 MPa. Vidare kan vi separera olika föreningar såsom aminosyror, nukleinsyror, kolhydrater, steroider, antibiotika och kolväten med användning av HPLC-tekniken, medan den snabba HPLC-tekniken huvudsakligen används för separation av proteiner.

Nedan infographic presenterar mer information om skillnaden mellan HPLC och snabb HPLC.

Sammanfattning - HPLC mot snabb HPLC

HPLC är en vätskekromatografisteknik som har blivit mycket populär över hela världen. Snabb HPLC är en ny version av HPLC, forskare vid Schering Plough Institute utvecklade denna nya teknik. Nyckelförskjutningen mellan HPLC och snabb HPLC ligger på det pumptryck som vi använder för separationen. Det är; Det pumptryck som vi använder för HPLC är cirka 40 MPa. Men pumptrycket för snabb HPLC är 3-5 MPa.

Referens:

1. "High Performance Liquid Chromatography." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 oktober 2018. Tillgänglig här 
"Du behöver ett fint system för att köra snabb HPLC - eller gör du?" Snabb HPLC - CHROMacademy. Tillgänglig här  

Image Courtesy:

1. "HPLC kolom" Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) via Commons Wikimedia  
2. "Lab's FPLC" Av Stephen Helms från Dallas, TX, USA - Our Lab's FPLC, (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia