Skillnad mellan omvänd fas och normal fas HPLC

De nyckelskillnad mellan omvänd fas och normalfas HPLC är att omvänd fas-HPLC använder en polär stationär fas och en mindre polär mobil fas medan normalfas-HPLC använder en ickepolär stationär fas och en polär mobil fas.

Den normala fasen HPLC är den äldsta tekniken för HPLC som Tswett använde vid separationer av växtekstrakter; han använde krita i en glaskolonn. Detta var det klassiska sättet för kromatografi som ledde till att beteckna det som den "normala" tekniken. HPLC med omvänd fas, å andra sidan, är motsatsen till den normala tekniken, vilka forskare utvecklat på senare tid.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är omvänd fas HPLC
3. Vad är normalfas HPLC
4. Jämförelse vid sida vid sida - Omvänd fas mot normal fas HPLC i tabellform
5. Sammanfattning

Vad är omvänd fas HPLC?

Omvändfas-HPLC är en kromatografisk teknik i vilken vi använder en hydrofob stationär fas. Bland alla HPLC-metoder använder vi denna metod för cirka 70% på grund av dess breda användbarhet och reproducerbarhet. Den stationära fasen är icke-polär och mobilfasen är polär.

De flesta gånger använder forskare en vattenhaltig blandning av vatten med ett blandbart polärt organiskt lösningsmedel, såsom acetonitril eller metanol som mobilfasen. Därför interagerar analyterna med den icke-polära stationära fasen.

Vad är normalfas HPLC?

Normalfas-HPLC är en kromatografisk teknik där vi använder en hydrofil stationär fas. Det är den traditionella metoden för HPLC, även om vi inte använder den så mycket. Den stationära fasen är polär, och den mobila fasen är icke-polär. Ännu viktigare är den mobila fasen av denna teknik 100% organisk. Det betyder att inget vatten används för detta.

Figur 01: En provprofil för HPLC-kromatogram med normal fas och omvänd fas enligt polariteten av komponenterna i analyten.

Typiskt innehåller den stationära fasen kiseldioxid, cyano, diol, aminoblandade faser, etc. Mobila faser innefattar organiska lösningsmedel, såsom hexan, etylacetat etc. Denna teknik baserar på retention av lösningsmedel eller analytmolekyler på den polära stationära fasen.

Vad är skillnaden mellan omvänd fas och normal fas HPLC?

Omvändfas-HPLC är en kromatografisk teknik i vilken vi använder en hydrofob stationär fas. Den stationära fasen av denna teknik är icke-polär. Den stationära fasen är icke-polär medan mobilfasen är polär. Vidare använder vetenskapsmän en vattenhaltig blandning av vatten med ett blandbart polärt organiskt lösningsmedel, såsom acetonitril eller metanol som den mobila fasen i omvänd fas-HPLC. Medan normalfas-HPLC är en kromatografisk teknik, i vilken vi använder en hydrofil stationär fas. Den stationära fasen av denna teknik är polär. Den stationära fasen är polär medan mobilfasen är nonpolär. Utöver det använder forskare organiska lösningsmedel, såsom hexan, etylacetat, etc. som den mobila fasen av normalfas-HPLC. Nedan infografiska presenterar skillnaden mellan omvänd fas och normalfas HPLC i en tabellform.

Sammanfattning - Reverse Phase vs Normal Phase HPLC

Omvändfas och normalfas-HPLC-tekniker är två vätskekromatografiska tekniker. Skillnaden mellan omvänd fas- och normalfas-HPLC är att omvändfas-HPLC använder en polär stationär fas och en mindre polär mobil fas medan normalfas-HPLC använder en ickepolär stationär fas och en polär mobil fas.

Referens:

1. Vatten. "HPLC Separations Modes." HPLC - High Performance Liquid Chromatography Explained: Waters. Tillgänglig här  
2. "Normalfasvätskekromatografi för separation av isomerer och föreningar som är instabila i vattenhaltig miljö." Normal_Phase_LC. Tillgänglig här