Varför acetokarmin används i mitotisk kromosomstudier

Olika fläckar används vid färgning av olika biologiska material. Fläckar reagerar med en specifik substans i ett biologiskt prov, vilket ger en specifik färg till den substansen. Acetokarmin är en fläck som används för demonstration av nukleinsyror i kromosomen. Det finns också några andra skäl som gör acetokarmin mer lämplig som en nukleinsyra fläck. De diskuteras i den här artikeln.

Viktiga områden som omfattas

1. Vad är en Stain
     -  Definition, typer av fläckar
2. Vad är acetokarmin
     - Definition, egenskaper, beredning
3. Varför acetokarmin används i mitotisk kromosomstudier
     - Framställning, användning av acetokarmin

Viktiga termer: acetokarmin, kromosomer, formaldehyd, hydrolys, mitokromosomstudier, fläckar

Vad är färgning

Staining är en teknik som används vid mikroskopiska studier av biologiska prover för att förbättra kontrast av det biologiska provet under mikroskopet. Det belyser strukturerna av biologisk vävnad, såsom specifika cellpopulationer, organeller, DNA, proteiner, kolhydrater och lipider. Fläcken kan vara antingen syntetiska kemikalier eller naturliga kemikalier som härrör från växter eller djur. Färgningsmetoderna beskrivs nedan.

1. Singelfärgning - Vid enkelfärgning används endast en fläck för att ge en enda färg till hela det biologiska provet.
2. Dubbelfärgning - Vid dubbelfärgning används två fläckar för att fläcka specifika organeller eller ett specifikt område.
3. Flera färgning - Vid multipel färgning används mer än två fläckar för den specifika färgningen av komponenter såsom organeller i provet.

Vad är acetokarmin

Karmin är en basfärg framställd av en insekt som är känd som Coccus kaktus. Acetokarmin produceras genom att blanda karmin med isättika. Det är en DNA-specifik fläck som används för visualisering av superlindade kromosomer under de olika stadierna av mitos.

Framställning av acetokarminfärg

1. Lös 10 g karmin i 1 liter 45% isättika.
2. Tillsätt aluminiumgranuler och återloppskokning i 24 timmar.
3. Filtrera i mörka flaskor och lagra vid 4 ° C.
4. Färgningen kan intensifieras genom tillsats av järnklorid (tillsätt 5 ml av en 10% järnkloridlösning per 100 ml% acetokarmin).

Varför Acetocarmin Stain används i mitotisk kromosomstudier

I allmänhet är acetokarmin ett färgämne som används vid enkelfärgning. Det fläckar både kärnor och cytoplasma. För att fläcka kromosomer samtidigt som cytoplasman är färglös bör det biologiska provet behandlas först med formaldehyd och då kan det hydrolyseras med HCl vid 60 ° C med korrekt hydrolyseringstid. Slutligen kan det behandlas med acetokarmin. Acetokarmin producerar stora färgämnena i svagt sura förhållanden (pH 4-5). Demonstrationen av lökrot mitos genom färgning med acetokarmin visas i Figur 1.

Figur 1: Lönsrotmitos

Emellertid är acetokarmin lätt toxisk än de andra nukleinsyrafläckarna, såsom aceto-orcein. Det är också billigare än andra typer av fläckar.

Slutsats

Fläckar används i mikroskopiska studier för att förbättra kontrasten av specifika biologiska komponenter i ett prov. Acetokarmin är en sådan fläck som används för att fläcka nukleinsyra inuti celler. Eftersom acetokarmin specifikt fläckar kromosomer utöver cytoplasmen kan den användas för att visualisera kromosomer i mitotiska studier.

Referens:

1. "ACETOCARMINE STAINING." Kansas State University, Tillgänglig här.
2.J. A. Rattenbury (2009) Särskild färgning av nukleolär substans med Aceto-Carmine, Stain Technology, tillgänglig här.

Image Courtesy:

1. "Onion root mitosis" Genom staticd - eget arbete (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia